因為酶聯免疫吸附技術目前在技術上缺乏尺度化，盡管目前上以及我國有了部門尺度血清或參比血清（血清盤）。因此，血標本在采集處理時應小心，在冰箱中保留不易過久。在酶聯免疫測定尤其是間接ELISA試劑盒中，試劑的特異性取決于。標本凝集不全時，血清中會殘留部門纖維蛋白原，也易造成假陽性。檢修標本中含有酶標記物的干擾物，內源性干擾物類風濕因子（RF）、黃疸等，類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體，多數為IgM類，能充當抗原成分與固相及酶標抗體反應，從而呈現非特異性顯色。
如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP（辣根過氧化酶），有海內報道酶免HBsAgELISA試劑盒測溶血標本時可造成假陽性。ELISA試劑盒中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見。外源性干擾物，經常因樣品采集、貯存、處理不當造成如樣品溶血，被細菌污染，標本凝集不全等。
如在冰箱中保留過久，其中的IgG可發生聚合，在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因為受方法學及技術前提的限制，在酶聯吸附測定中有時不可避免的會泛起一定的非特異性，但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，從而進步檢測的特異性，并得到更正確、可靠的實驗結果。
